Här nedan följer en maskininläst version av artikeln. Observera att det saknas styckeindelning, radbrytningar, mellanslag efter skiljetecken och att det kan förekomma stavfel.
SAMMANFATTATKromosomanalys
på odlade fostervatten- och moderkaksceller har en stor diagnostisk säkerhet , och metoden används därför rutinmässigt vid samtliga kliniskt genetiska avdelningar i Sverige .Det tar som regel 10-14 dagar innan ett fullständigt kromosomanalyssvar på fosterceller föreligger .Denna väntetid upplevs negativt av många par .Nya analysmetoder på fostervatten- eller moderkaksceller utan behov av cellodling tillåter ett svar på 1-2 dagar för de vanligaste numeriska kromosomavvikelserna .Strukturella kromosomavvikelser kan dock inte upptäckas med dessa metoder .Sedan fosterdiagnostik för kromosomavvikelser introducerades i början av 1970-talet har denna baserats på en fullständig kromosomanalys och karyotypering av fostervattenceller , och senare även av moderkaksceller när moderkaksprov taget i första trimestern introducerades i mitten av 1980-talet .Fullständig kromosomanalys kräver att cellerna odlas och därefter blockeras i metafasstadiet eftersom kromosomerna först
då kan analyseras på ett tillfredsställande sätt med hjälp av olika kromosombandningstekniker .Genom åren har cellodlingstiden kunnat förkortas avsevärt med hjälp av modernare cellodlingsmedier .Emellertid tar det idag som regel 10-14 dagar innan ett fullständigt kromosomanalyssvar på fosterceller föreligger .Denna väntetid upplevs negativt av många par .Interfas-FISH-analyserFörekomst av en numerisk kromosomavvikelse ( t ex trisomi 21 ) i ett fosterprov kan sedan några år analyseras inom 1-2 arbetsdagar med hjälp av FISH-teknik ( fluorescent in situ-hybridisering ) på vilande fosterceller ( fostervatten- eller moderkaksceller i interfas ) utan krav på långvarig cellodling och celldelning .Vanligen undersöker man om det föreligger ett normalt antal kromosom 13 , 18 , 21 samt könskromosomer , eftersom dessa kromosomer svarar för majoriteten av numeriska kromosomavvikelser i en lågriskpopulation .Testegenskaper för interfas-FISH-analys med DNA-sonder för kromosom 13 , 18 , 21 samt könskromosomer
har beräknats i en färsk metaanalys av olika studier där en fullständig kromosomanalys också utförts på samma fostervattenprov [ 1 ] .Det finns en nästan hundraprocentig överensstämmelse mellan metoderna för de kromosomer som avses .FISH-tekniken på interfasceller är dock arbetsintensiv och fortfarande dyr .Den används därför av många centra i Sverige och andra länder enbart på vissa indikationer ( vanligen avvikelser hos fostret upptäckta vid ultraljudsundersökning ) och då som komplement till en fullständig kromosomanalys .Kvantitativ fluorescent PCR ( QF-PCR )En alternativ teknik med samma ändamål som interfas-FISH är kvantitativ fluorescent polymeraskedjereaktionsteknik ( QF-PCR ) på moderkaks- eller fostervattenceller genom molekylär amplifiering av repeterade sekvenser i olika polymorfa lokus på till exempel kromosom 13 , 18 , 21 samt könskromosomerna ( Figur 1 ) .Under det senaste året publicerades två större serier .I en analys av 5 000 fostervattenprov där fullständig
kromosomanalys också utfördes på samma prov fann man 100 procents konkordans mellan metoderna för trisomi 13 , 18 , 21 och triploidi .Totalt diagnostiserades 96,3 procent korrekt av de avvikelser som potentiellt kunde detekteras med de DNA-sonder som användes .Andelen falskt negativa var 3,7 procent , samtliga för könskromosomavvikelser , och andelen falskt positiva 0 procent [ 2 ] .I en annan studie rapporterade Kathy Mann och medarbetare [ 3 ] om deras erfarenhet under ett års tid av multiplex QF-PCR där en blandning av olika primer-par för polymorfa repeterade sekvenser på kromosom 21 , 13 och 18 användes i ett » one-tube test « .1 148 fostervattenprov , 188 moderkaksprov och 37 prov från annan fostervävnad analyserades .Enstaka misslyckade amplifieringar inträffade i initialt skede .Man lyckades dock få fram ett svar i 98 procent av fallen .I 2 procent av fallen ( N=22 ) blev analysen icke-informativ på grund av maternell cellkontaminering .En fullständig kromosomanalys utfördes
också på samtliga prov .Inget falskt positivt eller negativt prov hittades .I nästan samtliga fall blev analyserna klara inom 1-2 dagar .En annan fördel med QF-PCR-analys är att man kan upptäcka maternell cellkontaminering , vilket kan vara omöjligt att diagnostisera med interfas-FISH eller kromosomanalys när fostret är kvinnligt .Fördelar och begränsningarKromosomanalys på odlade fostervatten- och moderkaksceller har en stor diagnostisk säkerhet , och metoden används därför rutinmässigt vid samtliga kliniskt genetiska avdelningar i Sverige och de flesta genetiska laboratorier utomlands där fosterdiagnostik bedrivs .Det finns ett önskemål från alla parter om ett snabbt svar vid fosterdiagnostik .Både interfas-FISH-analys och QF-PCR på fostervatten- eller moderkaksceller tillåter ett svar inom 1-2 dagar för de vanligaste numeriska kromosomavvikelserna ( trisomi 21 , trisomi 18 , trisomi 13 och de numeriska könskromosomavvikelserna ) .Bägge metoderna har begränsningar .Interfas-FISH används
för närvarande i Sverige och utomlands som ett komplement till en fullständig kromosomanalys vid kliniskt behov av ett snabbt svar .En utvärdering visar dock att cirka 1/3 av de kromosomuppsättningar som avviker skulle kunna missas om enbart interfas-FISH-analys skulle användas i stället för fullständig kromosomanalys .Denna begränsning gäller även för QF-PCR-metoden .Det bör dock framhållas att flertalet av de missade avvikelserna utgörs av balanserade strukturella kromosomavvikelser utan patologisk betydelse för det väntade barnet .[ 4 ] .Sådana fynd kan dock ha stor genetisk betydelse vid reproduktion och för genetisk vägledning av bärarna [ 4 ] .Interfas-FISH skulle kunna användas för att enbart besvara en riktad fråga , till exempel om fostret har trisomi 21 ( Mb Down ) .Detsamma gäller för QF-PCR om ytterligare studier kan bekräfta dess diagnostiska tillförlitlighet .Fördelen med QF-PCR är att metoden kräver en mindre mängd fosterceller och är mindre arbetskrävande än interfas-FISH
, då PCR lämpar sig för rationell hantering och stordrift .En utvärdering av denna metod pågår på Karolinska sjukhuset .Omkring 90 procent ( ? 7 000 prov/år i vårt land ) av alla kromosomanalyser på foster utförs för att det föreligger en förhöjd risk för autosomala trisomier på grund av moderns ålder ( framför allt Down syndrom ) .Denna frågeställning tycks besvaras med lika hög säkerhet med QF-PCR som med vanlig kromosomanalys men på kortare tid ( 1-2 dagar ) och till en betydligt lägre kostnad .Nackdelen är att man skulle kunna förbise enstaka ovanliga kromosomavvikelser som kan upptäckas med karyotypering .Totalt rör det sig om cirka 1 fall på 1 000 analyser , det vill säga 7-8 » missade « kromosomavvikelser/år .Det är ett politiskt snarare än medicinskt ställningstagande hur mycket resurser man skall använda för att hitta dessa ovanliga fall .Det förefaller rimligare att i stället använda resurserna till att erbjuda fler kvinnor med förhöjd risk fosterprov .Med i Sverige använda
urvalsrutiner förbises 70 procent av alla foster med kromosomavvikelser , medan andra länder som erbjuder lika många fosterprov hittar 70 procent eller fler genom användningen av bättre urvalsmetoder [ 5 ] .Figur 1 .Bilden visar QF-PCR-analys av fosterceller .I A ses 2 toppar som representerar alleler för en polymorf markör på kromosom 21 .Figuren visar att fostret har 2 alleler , vilket är normalt .B visar ett foster som har tre alleler för en kromosom 21-markör .Fyndet betyder att detta foster har tre kromosomer 21 , dvs trisomi 21 ( Downs syndrom ) .Från CyberGene AB , Huddinge .
